Tesis (Genética)

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Mutagénesis y replicación en células de Escherichia coli tratadas con bajas concentraciones de nitrosoguanidina.
(1974-06) Jiménez Sánchez, Alfonso; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
Cartografía genética por comutación con nitrosoguanidina
(1974-06) Pérez Lloveres, Cristina; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
Un agregado enzimático carotenogénico en Phycomyces: un estudio de complementación cuantitativa
(1974-06-22) González Aragón, Carlos; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
Regulación de la carotenogenesis en Phycomyces
(1975-01-20) Murillo Araujo, Francisco José; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
Esta Tesis estudia la regulación de la síntesis de carotenoides en el hongo Phycomyces blakesleeanus. El tipo silvestre del hongo produce casi exclusivamente β-caroteno, pero las cantidades acumuladas dependen de factores ambientales, como la luz, diversos productos químicos, la vecindad del sexo opuesto y las condiciones de cultivo.Se han caracterizado estirpes mutantes del hongo que acumulan del orden de cincuenta veces más β-caroteno que la estirpe silvestre.Las mutaciones correspondientes son recesivas y afectan a un mismo gen, para el que se propone la denominación carS. Se han estudiado cuantitativamente numerosos heterocariontes que llevan mutaciones carS y mutaciones en los genes previamente conocidos que afectan a la carotenogénesis, carA, carB y carR, y se ha concluido que carS es un gen distinto de los otros. Las mutaciones albinas carA y carB son epistáticas sobre las mutaciones superproductoras carS.Las mutaciones carA tienen un efectos dominante sobre la acción “superproductora” de las mutaciones carS. Este hecho apoya la idea previamente establecida de que el gen carA está implicado en algún aspecto regulador de la carotenogénesis y no codifica una enzima de dicha ruta metabólica.Una hipótesis que cuadra muy bien con todas las propiedades estudiadas de los mutantes carS es que dicho gen codifica un polipéptido implicado en un mecanismo de represión de la síntesis de las enzimas carotenogénicas. La represión depende de la concentración de β-caroteno. No se pueden excluir aún completamente algunas hipótesis diferentes.Independientemente, la carotenogénesis es activada por la presencia en un mismo micelio de núcleos de distinto sexo, presumiblemente por mediación de la síntesis de ácidos trispóricos. La carotenogénesis es activada también por la presencia de vitamina A y otros productos químicos, a través de un mecanismo que se diferencia notablemente de los anteriores. La estimulación de la carotenogénesis por la luz, conocida de antiguo en muchos organismos, comparte elementos comunes con la activación por vitamina A, pero es independiente de las mutaciones carS.Se han estudiado los dos efectos de la 2-(4-clorofeniltio) trietilamina (CFTA), estimulación de la carotenogénesis e inhibición de la ciclación del licopeno, en mutantes alterados en el gen carA, y se ha encontrado un paralelismo entre ambos efectos. Se han aislado mutantes insensibles simultáneamente a los efectos de la vitamina A y la CFTA. Su existencia indica que las acciones de estos dos productos químicos implican elementos comunes.Se han aislado y caracterizados algunos mutantes de la carotenogénesis, cuyas características fenotípicas son diferentes de las de los mutantes previamente conocidos en Phycomyces alterados en esta ruta biosintética. Dichos mutantes acumulan en medio normal una mezcla de varios carotenoides, pero en presencia de vitamina A acumulan β-caroteno casi exclusivamente.El efecto de la vitamina A sobre estos mutantes podría explicarse fácilmente si dicho compuesto favoreciera la transmisión de los sustratos en los agregados carotenogénicos, que habría sido alterada por las mutaciones introducidas en los mutantes.
Complementación cuantitativa entre mutantes del comportamiento en Phycomyces
(1975-05-26) Medina Precioso, Juan Ramón; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
Análisis genético de la carotenogénesis en el hongo "Phycomyces blakesleeanus"
(1978) Torres Martínez, Santiago; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
En esta Tesis se han realizado estudios genéticos y bioquímicos de mutantes con alteraciones en la carotenogénesis, su regulación interna y su estimulación por agentes químicos. Concluimos que: ... es New Roman','serif'; font-size: 12pt">1. un solo gen de
Aislamiento y caracterización de una estirpe de "Escherichia coli" inmutable por nitrosoguanidina
(1978) Ruiz Vázquez, Rosa María; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
En esta Tesis se ha abordado el estudio del mecanismo de acción de la nitrosoguanidina mediante el aislamiento y posterior caracterización de una estirpe inmutable por nitrosoguanidina. Se concluye que: ... 39;serif'; font-size: 12pt">1. En la mutagénesi
Bases genéticas de las respuestas a la luz de "Phycomyces blakesleeanus"
(1979) López Díaz, Isabel; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
En este trabajo se han estudiado las bases genéticas de varias respuestas de Phycomyces a la luz, concluyéndose que:1. El contenido de ß-caroteno de estirp ... e silvestre, aumenta en función de los valores absolutos de intensidad luminosa, a partir de un
Mutación y comutación inducidas por nitrosoguanidina en la levadura "Saccharomyces cerevisiae"
(1979) López Calderón, Isabel; Cerdá Olmedo, Enrique; Conde Zurita, Jaime; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
Incluye resumen
Genética de "Phycomyces blakesleeanus"
(1980) González Roncero, María Isabel; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
Variantes mutacionales no seleccionadas de la fosfatasa alcalina de "Escherichia coli"
(1982) Castillo Román, Francisco del; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
La polémica sobre la importancia relativa de la selección y de la deriva genética en el polimorfismo y la evolución moleculares (neutralismo contra seleccionismo) se encuentra estancada y la solución parece depender del desarrollo de nuevas vías experim .
Genética y fisiología de la tolerancia al etanol en "Saccharomyces cerevisiae"
(1983) Aguilera López, Andrés; Benítez Fernández, Concepción Tahía; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
En este trabajo se ha determinado el papel que juegan la herencia citoplasmática y la nuclear en la tolerancia al etanol de la levadura Saccharomyces ceriviae. Las principales conclusiones de este trabajo son: 1. La presencia de metabolismooxidativo mitocondrial hace que las actividades celulares de Saccharomyces ceriviae estén menos inhibidas por etanol. 2. La alta tolerancia a etanol está determinada por un elevado número de genes que cuando son mutados producen fenotipos de alta sensibilidad. En ningún caso se ha encontrado que la composición de lípidos celulares sea al factor más importante en la tolerancia al etanol.
Biosíntesis de carotenos y carotenoproteina en "Phycomyces blakesleeanus"
(1983) Concha Conejero, Amador de la; Murillo Araujo, Francisco José; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
En esta Tesis se ha estudiado la actividad carotenogénica de los extractos celulares de la estirpe silvestre y distintos mutantes de Phycomyces, así como el efecto sobre dicha actividad de ciertos factores. También se ha aislado y caracterizado un nuevo mutante en ... la carotenogénesis de dicho organismo. Se concluye que:- La carotenogénesis in vitro se ve afectada por el nivel del oxígeno en el ensayo. La síntesis de fitoeno es independiente de la presencia de oxígeno, siendo este requerido para la desaturación de fitoeno hasta licopeno.- Las mutaciones en los genes carB y carR provocan la inactividad de las enzimas deshidrogenasa del fitoeno y ciclasa del licopeno, respectivamente.- La estirpe C2, que tiene una mutación en el gen carA, presenta una actividad carotenogénica in vitro significativamente menor que la estirpe silvestre.- Se ha encontrado que el fitoeno trans participa en la ruta biosintética de carotenos en Phycomyces. - El retinol estimula la actividad de las enzimas carotenogénicas.- La difenilamina inhibe la actividad de la enzima deshidrogenasa del fitoeno y, a la vez, provoca una variación en la acumulación de isómeros de ese caroteno.- Se ha aislado una estirpe mutante de Phycomyces (S3o3) que acumula ß-caroteno de carotenoproteína.- La producción de carotenoproteína está determinada por un factor genético extranuclear y puede requerir también la presencia de una mutación en el gen nuclear carS presente, originalmente, en la estirpe S3O3.- La iluminación o presencia de retinol en los medios de cultivo inhiben la producción del complejo carotenoproteínico de la estirpe S3O3.- En la inhibición de la producción de carotenoproteína por el retinol juega un papel importante el anillo de esta molécula, siendo poco relevante la naturaleza del grupo funcional presente en el extremo de la cadena lateral.|
Genética de la deshidrogenasa del alcohol de Phycomyces
(1983-06-01) Garcés Mancheño, Rafael; Medina Precioso, Juan Ramón; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
RESUMEN y CONCLUSIONES 1. En esta Tesis de describe una nueva fotorrespuesta de Phycomyces que, sin prejuzgar el mecanismo molecular subyacente, hemos denominado “fotorrepresión de la ADH”: el perfil temporal de actividad ADH de los micelios de Phycomyces es diferente a la luz que a la oscuridad, siendo los valores a la luz sistemáticamente menores que los correspondientes a la oscuridad. 2. Ninguno de los genes mad estudiados está implicado en la nueva fotorrespuesta; puesto que los genes madA y madB están implicados en todas las demás fotorrespuestas conocidas de Phycomyces, la fotorrepresión de la ADH parece depender de un segundo fotosistema de Phycomyces. 3. El perfil temporal de actividades ADH a la luz de los micelios de la estirpe Cl49 (madD120 (-)) es anormal, presentando un pico de actividad entre el primer y tercer día de cultivo. Además, los valores de la actividad ADH de esta estirpe son mayores, tanto a la luz como a la oscuridad, que los correspondientes valores silvestres. 4. Excepto la mutación carS, las demás mutaciones estudiadas que afectan a la carotenogénesis ejercen un efecto pleitotrópico sobre la actividad ADH de Phycomyces, incrementándola por encima de sus valores normales. Esta relación entre carotenogénesis y actividad ADH también se observa cuando se altera químicamente, con difenilamina u otros agentes, la carotenogénesis del tipo silvestre, aunque el efecto estimulador sobre la ADH de la difenilamina no se debe exclusivamente a su efecto sobre la carotenogénesis. La fotorrepresión de la ADH, sin embargo, es normal en los mutantes car y en los micelios tratados con difenilamina. 5. Hemos detectado diferencias entre los patrones de electromorfos con actividad ADH de las especies Phycomyces nitens y Phycomyces blakesleeanus, lo que nos ha permitido asignar a la especie Phycomyces nitens dos estirpes de Phycomyces cuya posición taxonómica era incierta. Hemos identificado una banda proteica cuyo comportamiento electroforético corresponde al del electromorfo único con actividad ADH de Phycomyces blakesleeanus. Las alteraciones químicas o genéticas que incrementa la actividad ADH no hacen aparecer nuevos electromorfos con dicha actividad sino que aumentan la intensidad de tinción de dicha banda proteica. 6. Hemos demostrado que, aun siendo tóxico el alcohol alílico para las estirpes de Phycomyces blakesleeanus dotadas de actividad ADH, la acroleína es unas cien veces más toxica para dichas estirpes, lo que nos ha permitido aislar numerosos mutantes resistentes al alcohol alílico tratando las esporas con nitrosoguanidina o con ICR-170. Todos los mutantes resistentes a alílico analizados carecen de actividad ADH detectable. Proponemos que los mutantes resistentes a alílico se denominen mutantes adh. Algunas de las mutaciones adh son recesivas; otras, dominantes. No hemos encontrado complementación entre ninguno de los pares de mutaciones adh estudiadas. Proponemos denominar al gen identificado como adhA. La estirpe silvestre y C5 (carB10 (-)) acumulan pequeñas cantidades de etanol en el medio de cultivo; los mutantes adh, S292 y S371 no acumulan etanol. Una de las funciones de la enzima ADH de Phycomyces blakesleeanus parece ser, por tanto, catalizar la conversión de acetaldehído en etanol.
Análisis genético con transposones en Azotobacter vinelandii
(1986) Contreras de Vera, Asunción; Casadesús Pursals, Josep; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
Se han utilizado los transposones Tn5 y Tn10 y varios derivados de ellos para el aislamiento de mutantes y posteriores análisis genéticos. Se han construido diversos vehículos para introducir transposones en Azotobacter vinelandii y se han ensayado sin re
Germinación de las esporas de Phycomyces Blakesleeanus
(1986-02-06) Rivero Pallarés, Francisco; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
Caracterización genética de levaduras para la producción de etanol
(1987) Jiménez Martínez, Juan; Benítez Fernández, Concepción Tahía; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
Modificación de la biosíntesis de carotenoides de Gibberella Fujikuroi
(1987) Ávalos Cordero, Francisco Javier; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
La tesis describe los efectos mutagénicos de la n-metil-n'-nitro-n-nitrosogua-nidina y la radiación ultravioleta sobre Gibberella fujikuroi. Se describen las caracteristicas de distintos tipos de mutantes alterados en la biosíntesis de carotenoides y se clasifican en cuatro grandes grupos fenotípicos: Superproductores albinos de color alterado y pálidos en la oscuridad. Se describe la producción de Giberelinas por los distintos tipos de mutantes y se establece la regulación independientes entre las biosíntesis de Giberelinas y carotenoides.
Fotomorfogénesis de Phycomices
(1988) Corrochano Peláez, Luis María; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
La luz azul regula el desarrollo de los esporangióforos (cuerpos fructíferos) de Phycomyces. Existen dos tipos de esporangióforos, de distintas longitud, necróforos y necróforos. La iluminación continúa de cultivos inoculados con cien mil esporas sobre ag
Mutantes superproductores de beta-caroteno de "Phycomyces blakesleeanus"
(1988) Salgado Rodríguez, Luis Miguel; Cerdá Olmedo, Enrique; Universidad de Sevilla. Departamento de Genética
Esta Tesis aplica métodos genéticos y bioquímicos al estudio de la biosíntesis de caroteno en el hongo Phycomyces blakesleeanus.El análisis ... Los mutantes carD contienen de 600 a 900 ug de beta-caroteno por g de materia seca en las condiciones normales y responden a las cuatro vías de activación ambiental de la carotenogénesis. Este gen está cerca del centrómero de un cromosoma diferente del que contiene los genes reguladores, carA y carS, y los genes estructurales de la carotenogénesis.La epistasia de las mutaciones carS y carA sobre el gen carD indica que sus productos actúan en un mismo mecanismo de regulación de la carotenogénesis.

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