Estudio de la señal de calcio y las corrientes iónicas en el acoplamiento entre el estímulo y la secreción en células pineales en la rata

Abstract

Se han empleado distintas técnicas para estudiar los mecanismos implicados en las diferentes etapas del proceso de acoplamiento estímulo-secreción en pinealocitos: microfluorometria para monitorizar cambios en la (ca2+)i, la técnica de "patch clamp" para estudiar las conductancias de la membrana y el potencial de membrana, la amperometría/voltametría para la detección electroquímica de sustancias secretadas por la célula y el registro de la capacidad eléctrica como medida de los cambios en la superficie de la membrana plasmática.Noradrenalina (na) produce un incremento de la (ca2+)i bifásico resultantes de la liberación de ca2+ de almacenes intracelulares y de la entrada de ca2+ desde el medio externo, respectivamente. Acetilcolina (ach) también produce un incremento transitorio de la (ca2+)i. Los agonistas alfa1-adrenergicos y muscarinicos liberan ca2+ selectivamente de almacenes intracelulares, insensibles a cafeína, funcionalmente distintos. Ambos neurotransmisores (na y ach) activan dos corrientes iónicas transitorias: una de potasio (lk) y otra de cloruro (lcl) dependientes de ca2+. La ach produce cambios bifásicos del potencial de membrana (despolarización e hiperpolarización). El medio de cultivo tras varias horas de la siembra de pinealocitos contiene serotonina y melatonina. Los resultados obtenidos con las medidas de capacidad eléctrica y de amperometría sugieren que uno o varios de los productos sintetizados en la pineal son almacenados intracelularmente en vesículas y secretados por exocitosis.