Aplicación de un método inmunocitoquímico que utiliza el complejo avidina-biotina-peroxidasa al diagnóstico de los síndromes linfoproliferativos crónicos

Abstract

En este trabajo se utiliza un método inmunocitoquímico basado en el sistema avidina biotina, con la finalidad de valorar su utilidad para reconocer antígenos que se expresan débilmente. Para ello lo hemos aplicado a muestras procedentes de 65 pacientes con un síndrome linfoproliferativo crónico, 62 de los cuales presentaban una leucemia linfoide crónica. Como anticuerpos primarios, se han utilizado anticuerpos monoclonales con especificidad para las cadenas pesadas y ligeras de las inmunoglobulinas. Los resultados han sido comparables a los mejores obtenidos por otros metodos. La inhibición de la peroxidasa endógena se realizo en algunos casos, quedando demostrado el efecto nocivo que tiene sobre estos antígenos por lo que se recomienda no utilizarla en muestras en las que la contaminación con células que contienen peroxidasa sea mínima. Así mismo, se han estudiado las subpoblaciones linfocitárias cd4+ y cd8+ en las muestras de aquellos pacientes no tratados, diagnosticados de leucemia linfoide crónica, con la finalidad de comprobar la habilidad de este método inmunocitoquímico para detectar dichos antígenos, así como para analizar los cambios cuantitativos de dichas subpoblaciones y de su cociente en diversas fases evolutivas de la enfermedad. Los resultados han sido comparables a los obtenidos por otros investigadores. Finalmente se ha realizado un estudio comparativo con 26 soluciones fijadoras, frente a la acetona. Destaca el resultado obtenido con algunas de ellas, principalmente con el butanol, fijador cuya utilización no la hemos encontrado en citologia hematológica, con el cual se obtuvo en un apreciable porcentaje de casos un resultado mejor en inmunotinción al obtenido con la acetona.