Nueva alternativa a la cirugía en la queratopatía neurotrófica. Formulación de liposomas de extracto de membrana amniótica

Abstract

INTRODUCCIÓN. La queratopatía neurotrófica (QN) es una enfermedad rara que afecta entre 1-5 de cada 10000 personas. Cursa con la aparición de defectos epiteliales de la córnea, produciendo úlceras y cicatrices, lo que compromete seriamente la visión. El tratamiento en casos graves consiste en un trasplante de membrana amniótica. OBJETIVO. Desarrollar nuevas formulaciones de extracto de membrana amniótica (EMA) menos agresivas que un trasplante, en forma de liposomas deformables. MÉTODOS. La cuantificación de proteínas se realizó usando el método del ácido bicinconínico (BCA). Las formulaciones de liposomas se elaboraron mediante la técnica TLE (Thin Layer Evaporation), partiendo de una composición previa de fosfatidilcolina, colesterol y EMA en tampón HEPES. Para obtener la composición deseada de las vesículas, se realizó un diseño experimental en el que se evaluó el tamaño, el índice de polidispersión (PDI), la carga y la eficacia de encapsulación (EE) obtenidos en función de distintos parámetros. Una vez optimizada la formulación, se realizaron ensayos in vitro de liberación y permeación, cuantificando la hCG por HPLC. RESULTADOS. El método BCA resultó ser lineal, exacto, repetitivo y preciso. Tras la elaboración y caracterización de una serie liposomas con distintas combinaciones en su composición y el análisis a través de una matriz Taguchi, se determinó el efecto de las variables en las características medidas. Atendiendo a los requerimientos de tamaño, PDI, carga y EE, se estableció como composición ideal el desoxicolato sódico (NaDC) como agente deformable, estearilamina como agente de carga en una cantidad de 0.06 mmol y una dilución al 75% del extracto. Esta composición mejoró los comportamientos de liberación y permeación de hCG. CONCLUSIONES. Este estudio ofrece nuevas posibilidades para mejorar el tratamiento de la QN mediante el uso de formulaciones no invasivas. En un futuro se iniciarán los estudios de eficacia in vivo.