Desarrollo y validación de un método analítico para la cuantificación de Ranitidina en plasma por Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC)

Abstract

A reversed phase high - liquid chromatography method for quantifying ranitidine using nizatidine like a internal standard has been developed. The method first involves a purification step of samples using a solid - phase extraction with C18 columns. The extracts have been evaporated at 60 oC in a water bath under a stream of nitrogen gas. The quantitation has been carried out onto C8 column, with a mobile phase of ammonium phosphate pH 7.8 - methanol (70:30, v/v), at a flow rate of 1 mL/min and a detection at a wavelength of 322 nm. The procedure has been validated and linear responses were obtained between 10.2 and 1600 ng/mL. Other parameters of validation such as: selectivity, precision, accuracy and limit of quantitation were in satisfactory agreement with the Report Conference from Washington. The stability of ranitidine in plasma has been studied when the samples were subjected to cycles of freezing and thawing and during the storage period.

En este trabajo se presenta el desarrollo de un método de cuantificación de ranitidina por cromatografía líquida en fase reversa, empleando como estándar interno un derivado suyo, la nizatidina. El método implica una etapa previa de purificación de las muestras utilizando para ello un sistema de extracción en fase sólida con columnas C18. Los extractos obtenidos se secan a 60oC en un baño maría con corriente de nitrógeno. La cuantificación se lleva a cabo sobre una columna C8, con una fase móvil de fosfato de amonio pH 7.8 - metanol (70:30) a una velocidad de flujo de 1 mL/min y una longitud de onda de 322 nm. El procedimiento es objeto de validación y muestra ser lineal en un rango de 10.2 a 1600 ng/mL. Parámetros adicionales de validación, tales como: especificidad, precisión, exactitud y límite de cuantificación cumplen las especificaciones requeridas para este tipo de ensayos, conforme a la Conferencia de Washington. La estabilidad de la ranitidina en plasma cuando las muestras se someten a ciclos de congelación y descongelación y a lo largo del periodo de almacenamiento también ha sido objeto de estudio.