Localización, clonación y organización de los genes de la nodulación en Rhizobium trifolli

Abstract

1. Rhizobium trifolii RS1051 alberga tres megaplásmidos, de pesos moleculares aproximados de 190, 280 y 470 Mdal. El menor de ellos, pRtrRS1051a, es autotransmisible y el plásmido simbiótico, pSym, de esta cepa, pudiendo ser expresado en cepas curadas de Agrobacterium tumefaciens, a las que capacita para nodulación ineficiente de trébol. 2. Se han obtenido derivados deleccionados y curados del plásmido simbiótico de RS1051, que son indispensables para cualquier estudio genético. Así mismo, se han subclonado regiones intragénicas de los genes nodC y hsnD de R. meliloti 41, que son particularmente útiles como sondas radiactivas. Igualmente, se ha construido un banco de genes de R. trifolii RS1051 que se ha demostrado posee unas elevadas calidad y representatividad, y que es un material biológico de inapreciable utilidad y versatilidad. 3. En dos capas distintas de R. trifolii se ha encontrado un comportamiento muy similar frente a sondas radiactivas conteniendo genes nif y nod de R. meliloti 41, lo que revela una organización similar en los genes simbióticos: nodD se presenta en dos copias, de las cuales probablemente sólo una es funcional, y la otra está situada en RS1051 en un replicón que no es el plásmido simbiótico; hsnD está ausente, y nodC, nodD y hsnB, esto es las regiones de especificidad de hospedador y nod común, se hallan íntimamente agrupadas en el plásmido simbiótico.|