Análisis Funcional de la Fosforilación de Securina

Abstract

El objetivo de esta Tesis se engloba dentro de un estudio más amplio sobre el análisis funcional de la fosforilación de Securina, y para ello nos hemos planteado abordar dos objetivos concretos: ... 39;serif'; font-size: 12pt">1.- Obtención de mutantes de Securina en residuos potencialmente susceptibles de fosforilación y estudio del efecto de la mutación sobre determinadas propiedades de las proteínas mutantes. Partimos del conocimiento de que Securina se fosforila en la transición G2/M, y que el tratamiento con inhibidores de fosfatasas provoca la aparición de una serie de formas fosforiladas inestables. Con el objetivo de determinar los residuos de Securina que se fosforilan hemos obtenido una colección de mutantes y caracterizado algunas propiedades de las proteínas mutantes. Se han generado líneas celulares estables de las mutaciones más interesantes y analizado el efecto de estas mutaciones sobre el avance del ciclo celular y sobre la capacidad de invasión.2.- Identificación de quinasas de Securina. Securina se fosforila en la transición G2/M y se sabe que una de las quinasas que intervienen es la quinasa mitótica CDK1. En condiciones de estrés genotóxico, radiación ultravioleta, Securina es diana de la glucógeno sintetasa kinasa 3β, GSK-3β. En este trabajo se ha tratado de identificar quinasas implicadas en la fosforilación de Securina en ausencia de estrés genotóxico y la función de estas fosforilaciones.