Resumen | Nos hemos propuesto en nuestro trabajo estudiar los resultados conseguidos mediante la técnica que detallaremos a continuación y en comparación con los resultados obtenidos por los autores mencionados anteriormente, así ...
Nos hemos propuesto en nuestro trabajo estudiar los resultados conseguidos mediante la técnica que detallaremos a continuación y en comparación con los resultados obtenidos por los autores mencionados anteriormente, así como también obtener imágenes de microscopía electrónica de barrido de tejidos del aparato ocular de los que hasta ahora no creemos que existiera documentación.
CONCLUSIONES
1. La microscopía electrónica de barrido es una moderna técnica de investigación, que nos proporciona imágenes a gran aumento de las piezas estudiadas, y con una gran profundidad de campo, gracias a lo cual y al aspecto sombreado de las imágenes, la imagen se observada en relieve.
Las piezas estudiadas por este método e pueden observar bajo distintos puntos de vista en cualquier momento de su estudio; por ello, la información que obtenemos de cada muestra es muy simple.
2. No obstante, la microscopía electrónica de barrido por sí sola no es suficiente para llegar a la comprensión de la estructura íntima de los materiales biológicos, ya que mediante su uso únicamente podemos estudiar los detalles de la superficie de las piezas. La estructura interna de las células queda por tanto reservada al estudio con el microscopio óptico o el microscopio electrónico de transmisión.
Por lo tanto, la microscopía electrónica de barrido solo se puede considerar como un medio de estudio complementario, aunque de gran valor.
3. La preparación de las piezas para su estudio mediante el microscopio electrónico de barrido es en general bastante más simple que para la microscopía convencional o el microscopio electrónico de transmisión. Métodos de preparación muy simples dan excelentes resultados, y solamente en casos muy limitados hacen falta métodos de preparación muy elaborados.
Tanto la congelación como la fijación con glutaraldehido o tetraóxido de osmio dan buenos resultados. Por el contrario, la fijación con formaldehido produce numerosos artefactos y debe ser rechazada.
4. Nuestro método de fijación simple con glutaraldehido al 3% en tampón cacodilato, deshidratación en serie alcohólica, secado en vacío y evaporación con oro es de una gran sencillez y de rápida ejecución, pudiéndose observar las muestras en menos de cinco horas después de su obtención y obteniéndose con él resultados similares a los que se alcanzan con otros métodos más complicados.
Únicamente en la preparación de piezas de gran espesor, como es el cristalino, el método se ha mostrado totalmente inadecuado.
Nuestro método se ha mostrado en cambio como muy poco agresivo para todos los tejidos, por lo cual consideramos que es un método de elección para el estudio de estructuras especialmente delicadas.
5. Como principal ejemplo de su gran resultado en el estudio de las estructuras delicadas, hemos hallado unas mallas intertrabeculares de una arquitectonia especialmente sutil, y que hasta ahora no estaban descritas. Estas mallas, auténticas telas de araña intertrabeculares, desaparecen o se alteran profundamente cuando se instaura una hipertensión ocular.
6. En nuestro estudio hemos descrito también otras estructuras oculares que –por lo menos en la bibliografía a nuestro alcance- aún no habían sido estudiadas mediante el microscopio electrónico de barrido, especialmente, la membrana de Descemet, los tendones de inserción de los músculos extraoculares y las vías lagrimales.
No consideramos que nuestro estudio aporte ningún dato realmente nuevo al conocimiento de estas estructuras, pero sí facilita en gran manera el conocimiento de su verdadera constitución tri-dimensional, hecho este que es característico de todos los estudios con microscopía de scanning.
7. El análisis de muestras biológicas mediante la microsonda de rayos X, es un método de estudio recientísimo, que consideramos que puede llegar a resolver muchas de las actuales incógnitas de la fisiología, tanto ocular como general. No obstante, será preciso para ello contar con instrumentos de extremada precisión y sensibilidad.
8. El análisis de los cuerpos extraños oculares con la microsonda de rayos X, nos ha permitido en todos los casos una exacta determinación tanto de su forma y tamaño, como de su composición química, abriendo caminos para su prevención y tratamiento cuyo alcance aún no podemos preveer.
9. Consideramos que dentro del estudio del aparato ocular, la aplicación del microscopio de barrido que es más interesante es el estudio del ángulo camerular, y especialmente del trabéculum, ya que la rapidez del método, la posibilidad de orientar las piezas en diversas direcciones, la poca alteración que los métodos de fijación producen en los tejidos, y sobre todo, la conservación de la sensación de relieve en el estudio de las piezas, hacen del microscopio electrónico de scanning el instrumento de estudio ideal para una estructura tan dinámica y de una arquitectonia tri-dimensional tan complicada como es el trabéculum.
Somos conscientes de las limitaciones de la microscopía electrónica de barrido, así como de su elevado costo en relación a los pequeños resultados obtenidos hasta el momento, pero pensamos que este método de estudio todavía no hace ni diez años que ha empezado a desarrollarse, y que debe por tanto darnos unos resultados cada vez más interesantes, a medida que se vayan resolviendo los problemas técnicos que aún tiene planteados.
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