Aproximación histoquímica al estudio de la actividad estrogénica y antiestrogénica

Abstract

En 1978, Lee describió un método histoquímico para el estudio de los receptores de estrógenos en el cáncer de mama humano. Desde su introducción, el enfoque histoquímico entró en conflicto de método e intereses con el tradicional análisis bioquímico. La técnica histoquímica ha sido acogida con entusiasmo en países como Italia, en tanto que el ensayo bioquímico continua siendo extensamente aplicado en Estados Unidos, donde la existencia de una amplia y costosa infraestructura de tecnología y personal de cara al análisis bioquímico es uno de los factores que obstaculiza un debate objetivo. La comparación de los resultados obtenidos mediante ambos métodos ha sido objeto de múltiples estudios y la validez del ensayo histoquímico en la predicción de la respuesta del cáncer de mama a la terapia hormonal está documentada en la literatura. El presente trabajo pretende ir más allá de la controversia en torno al cáncer de mama y explorar otras aplicaciones del método histoquímico, con lo que esperamos al mismo tiempo aumentar su base científica. Recientemente se ha demostrado que la inyección subcutánea de estradiol aumenta la síntesis de una(s) substancia(s) ligadora(s) de estrógenos en el citoplasma del epitelio luminal del útero de ratas inmaduras y ratas adultas ovariectomizadas, en tanto que la progesterona, pero no la hidrocortisona, antagoniza este efecto. Este fenómeno puede visualizarse fácilmente con la técnica histoquímica propuesta por Lee. Por otra parte, el procedimiento clásico para valorar la actividad estrogénica de un compuesto es observar el grado de cornificación vaginal en ratas hembras adultas ovariectomizadas o el aumento del peso uterino en ratas inmaduras tras la inyección del compuesto problema. Para medir la actividad antiestrogénica se observa la capacidad del compuesto en estudio para inhibir la cornificación vaginal o el aumento del peso uterino inducido por estrógeno. Estos procedimientos conllevan muchos pasos, consumen mucho tiempo y son excesivamente laboriosos. Nuestra hipótesis de trabajo es que el enfoque histoquímico ofrece un medio más simple para detectar y estudiar los acontecimientos intracelulares provocados por compuestos estrogénicos o antiestrogénicos. Mediante el análisis histoquímico de los efectos de los estrógenos y antiestrógernos sobre los receptores de estrógenos en el útero de la rata, nos proponemos investigar la posibilidad de aplicar este enfoque a la observación de los fenómenos estrogénicos y antiestrogénicos a nivel celular. CONCLUSIONES 1. El método histoquímico para determinación de receptores de estrógenos detecta un aumento sostenido en la síntesis de substancias ligadoras de estrógenos en el citoplasma de las células del epitelio luminal de la rata en respuesta a la administración repetida de compuestos estrogénicos como el estradiol y el dietilestilbestrol. 2. La administración de antiestrógenos (tamoxifeno, nafoxidina o nitromifeno) produce un aumento inicial y transitorio de la actividad ligadora de estrógenos, que luego retorna al nivel basal y permanece en él durante todo el resto del tratamiento antiestrogénico. 3. cuando el tamoxifeno, la nafoxidina o el nitromifeno se administran previamente al estradiol o al dietilestilbestrol, no se registra ningún aumento en la actividad ligadora de estrógenos. 4. Los datos obtenidos en nuestro estudio son concordantes con las observaciones proporcionadas por la aplicación a citosoles uterinos del método bioquímico del carbón activo cubierto con dextrano; por tanto, podemos concluir que la substancia ligadora observada por el método histoquímico está íntimamente relacionada con los receptores de estrógenos o constituye parte del sistema receptor de los estrógenos. 5. Si, tal como hemos creído demostrar en este trabajo, el método histoquímico realmente detecta una parte al menos del sistema receptor, debemos considerarlo como una alternativa válida al actualmente imperante método bioquímico para determinación de receptores de estrógenos en el cáncer de mama humano. 6. La síntesis celular de la substancia ligadora de estrógenos no parece estar acoplada al proceso de crecimiento celular en general, puesto que tanto el estradiol como el tamoxifeno producen hipertrofia de las células del epitelio uterino que persiste cuando el tratamiento previo con tamoxifeno inhibe la síntesis de la substancia ligadora de estrógenos inducida por la administración de estradiol. 7. La técnica histoquímica para determinación de receptores de estrógenos constituye un método válido para la detección y estudio de compuestos con actividad estrogénica o antiestrogénica. 8. Demostradas las bases científicas del método histoquímico en este y otros trabajos, se necesitan estudios de correlación clinicopatológica a gran escala que determinen la validez clínica de la técnica histoquímica y la comparen con la del método bioquímico.