Inmunología en la tos ferina. Valoración por los anticuerpos fluorescentes

Abstract

Se ha pretendido encontrar un método para evidenciar el estado inmunitario humano frente a la Tos Ferina, por medio de la demostración del contenido en anticuerpos séricos contra la bordetella pertussis basándose en el empleo de los anticuerpos fluorescentes. Se supuso que los cuerpos de bordetella fijados, al ser puestos en contacto con plasma –o suero- humano fijarían en su superficie los anticuerpos específicos presentes en dicho plasma. Eliminado el sobrante de plasma y lavados los cuerpos bacterianos, quedarían definitivamente recubiertos por los anticuerpos en los lugares de acción individuales. En el caso de que en el plasma problema no existieran anticuerpos específicos, los bordetella permanecería inalterados y su superficie quedaría limpia después del lavado. Cuando a continuación se pongan los cuerpos bacterianos en contacto con anticuerpos específicos antibordetella, hechos visibles por la conjugación con un radical fluorescente, los gérmenes que no han sido recubiertos por anticuerpos humanos, por haber sido tratados por plasmas que no los contenían, fijarían los anticuerpos fluorescentes. Los cuerpos bacterianos que hubieran quedado neutralizados en sus puntos específicos antigénicos por los anticuerpos antibordetella del plasma procedente de sujetos inmunes, no fijarán los conjugados fluorescentes. En cada caso, la observación al microscopio de fluorescencia daría un resultado totalmente diferente. Las reacciones practicadas con plasmas inmunes, no presentarían fluorescencia; las realizadas con plasmas de sujetos que no poseyeran anticuerpos, presentarían una fluorescencia igual a la de extensiones de control, en las que los bordetella fueran puestos en contacto directamente con conjugados fluorescentes, sin haber sido previamente tratados con plasma de cualquiera que fuese su estado inmunitario. Finalmente, una contraprueba, realizada a base de anticuerpos antibordetella fuertemente activos –sueros hiperinmune, globulina gamma específica- mostraría total ausencia de fluorescencia después de la segunda fase de la prueba con el intento de impregnación con el conjugado. Fluorescencias intermedias, con número de gérmenes y/o en intensidad del brillo, podrían ser valoradas como resultados con una escala de intensidad relativas, equivalentes a cantidades variables de anticuerpos activos con los plasmas investigados. Se estudia la inmunidad antiinfecciosa y la específica contra la tos ferina. Se emplea un método para determinar las defensas frente a la Bordetella Pertussis utilizando anticuerpos fluorescentes, con una técnica de inhibición original. La cantidad de fluorescencia es inversamente proporcional a los anticuerpos existentes. En los niños menores de un mes los resultados han sido negativos, aumentando la positividad con la edad hasta más del 60%. Igualmente en los niños vacunados o que han padecido la tos ferina, los resultados positivos alcanzan hasta el 90%. CONCLUSIONES: 1. La infección por Bordetella Pertussis, localizada en la zona ciliar del epitelio respiratorio provoca en este unas alteraciones que definen la anatomía patológica de la tos ferina a ese nivel. 2. La información antigénica se realiza o bien por el paso de escasísimos gérmenes a la región submucosa o por la salida de linfocitos a la zona ciliar, los cuales reingresan en el torrente circulatorio. 3. El aglutinógeno 1, termostable, es el principal elemento antigénico de la bordetella y está relacionado con la membrana bacteriana. 4. Este aglutinógeno provoca: La producción de aglutininas, la fijación del complemento, las reacciones de hipersensibilidad cutánea y es el que se combina con los anticuerpos fluorescentes. 5. El anticuerpo producido contra este antígeno es probablemente una inmunoglobulina IgM. También puede intervenir un anticuerpo del orden IgE. 6. Estos anticuerpos por su naturaleza no se transmiten a través de la placenta, ni se eliminan por el calostro ni por la leche materna. 7. La presencia de inmunoglobulinas antipertussis en el plasma se puede demostrar por un método basado en la fijación de anticuerpos fluorescentes específicos sobre las bordetellas. 8. Este método consta de un doble proceso: Primero.- Los B. Pertussis tratados con plasma que contenga anticuerpos específicos fijan a éstos en su superficie. Si el plasma no los contiene, no se produce alteración de las membranas de las bacterias. 9. Segundo.- Al poner en contacto los gérmenes con anticuerpos fluorescentes, éstos no se fijan sobre las Bordetella recubiertas por inmunoglobulinas específicas procedentes del plasma. Las que tienen su superficie sin alterar, se recubren de anticuerpos fluorescentes. 10. En la observación microscópica de fluorescencia, los gérmenes que hayan estado en contacto con plasma que contuvieran defensas contra la tos ferina. Permanecen invisibles. 11. Los gérmenes tratados con plasma sin inmunoglobulinas específicas, mostrarán una fluorescencia interna. 12. Se aprecian fluorescencias parciales en proporción inversa al contenido en anticuerpos específicos de los plasmas. 13. Este procedimiento para demostrar las defensas contra la tos ferina han dado resultados coincidentes con las previsiones teóricas. 14. En los menores de un mes no se han demostrado anticuerpos específicos. 15. Al aumentar la edad, aumenta la proporción de niños con defensas: Los menores de un año dan resultados positivos en el 11,5%; los de uno a tres años en un 55%; los de tres a siete años lo dan en un 62,5% y los de siete años y más poseen anticuerpos en un 60%. 16. Este último resultado corresponde al hecho de que la tos ferina va haciéndose más frecuente en los niños mayores, a partir de los diez años, por la disminución de la eficacia de las vacunaciones realizadas en los primeros años de la vida. 17. En los niños que han experimentado contacto con la B. Pertussis, bien por vacunaciones o por haber padecido la tos ferina, los resultados positivos oscilan entre el 75 y el 90% según los grupos. 18. La demostración del grado de inmunidad contra la tos ferina obtenida por el método de los anticuerpos fluorescentes presentan una correlación muy alta con los datos suministrados por los métodos clásicos (aglutinaciones, fijación del complemento y pruebas cutáneas.)