Identificación y análisis de nuevos genes y mecanismos moleculares implicados en la Enfermedad de Hirschsprung

Abstract

En la presente tesis doctoral se propone la realización de estudios de expresión en cultivos de precursores entéricos para profundizar en el conocimiento del desarrollo del SNE, en el contexto de HSCR, y así llevar a cabo una mejor caracterización de los mismos y realizar la búsqueda de nuevos genes implicados en la patología, basándonos en diferencias de expresión de genes en estudios de pacientes y controles. A partir de dichos estudios de expresión se han obtenido diferencias en cuanto a niveles de expresión entre pacientes y controles en siete genes descritos en células madre pluripotentes humanas (DNMT3B, FN1, LAMC1, PAX6, NESTINA, ECAM, SEMA3A) y cuatro factores de transcripción descritos en células embrionarias humanas (CDYL, MEIS1, STAT3 y PAX6). De todos ellos se ha estudiado con más detalle el papel de la metiltransferasa DNMT3B encargada de establecer los patrones de metilación de novo durante el desarrollo embrionario, en relación con el desarrollo del SNE en el contexto de HSCR. Y por otro lado, se han estudiado las causas subyacentes a la disminución en los niveles de expresión de PAX6 obtenida en precursores entéricos procedentes de pacientes HSCR, cuya actividad principal es regular la proliferación y diferenciación celular. Así mismo, por primera vez se demuestra la implicación de un mecanismo epigenético en relación con el desarrollo de la enfermedad de Hirschsprung dada la hipometilación global obtenida en precursores entéricos de pacientes, evento que potencialmente puede inducir alteraciones en la activación de factores de transcripción, entre ellos PAX6, así como la sobreexpresión de genes críticos en la regulación del crecimiento celular.