Estudio molecular de la inactivación del cromosoma X en mujeres y su relación con los distintos fenotipos asociados al gen FMR1

Abstract

Las premutaciones y mutaciones en el gen FMR1 se asocian con diferentes fenotipos. Además, por ser un gen que se localiza en el cromosoma X la afectación es diferente en varones y mujeres. Nuestra hipótesis de trabajo es que el sesgo en la inactivación del cromosoma X determina el grado de afectación en las mujeres portadoras de premutación o de mutación completa. Aunque se postula que en la población general la inactivación del cromosoma X es al azar, desviaciones de la inactivación hacia uno u otro cromosoma X influencia la mayor o menor penetrancia del síndrome. Si el sesgo implica mayor inactivación del cromosoma X normal las manifestaciones del síndrome serán mayores que si el sesgo se corresponde con un porcentaje mayor de inactivación del cromosoma patológico. Objetivos. - Desarrollar la metodología para el análisis del estado de metilación de diferentes loci en el cromosoma X para determinar su estado de activación. - Estudiar la frecuencia del sesgo en la población no X frágil y en las pacientes X frágiles. - Estudiar el sesgo en mujeres con mutación completa y su importancia en la expresión del fenotipo X frágil. - Determinar si la inactivación aberrante del cromosoma X en varones pudiera ser causa del aborto espontáneo. - Analizar el sesgo en mujeres portadoras de premutación y relacionarlo con los diferentes fenotipos asociados a las premutaciones. - Estudiar los niveles de ARNm del gen FMR1 y correlacionarlo con el sesgo en la inactivación del cromosoma X en mujeres portadoras. Conclusiones. - La metodología empleada de digerir con enzimas de restricción sensibles a metilación y PCR posterior aporta resultados coherentes e indicativos de inactivación del cromosoma X. - En las pacientes X frágiles portadoras de mutación completa el sesgo en la inactivación del cromosoma X se corresponde con los niveles de expresión del ARNm del gen FMR1 de la proteínas FMRP, dando lugar a fenotipos diferentes teniendo el mismo tamaño de la mutación. - En las pacientes X frágiles portadoras de premutación, el sesgo en la inactivación del cromosoma X normal puede ser causa de mayor afectación de los síndromes asociados a la premutació. - En las familias estudiadas la ausencia de sesgo no protege de la aparición del fenotipo correspondiente, y la ausencia de síntomas se relaciona con el sesgo hacia el cromosoma X normal. - Las mujeres portadoras de premutación tienen niveles elevados de ARNm del gen FMR1 presentando niveles más elevados aquellas que muestran un sesgo hacia la expansión del cromosoma X afectado. - Locus cercanos en el cromosoma X siguen un patrón idéntico de metilación mientras que aquellos que están más alejados pueden presentar un patrón de mutilación diferente debido al crossing-over. - La inactivación aberrante del cromosoma X en los primeros estadíos de gestación puede ser una posible causa de aborto espontáneo en fetos varones. - Promover el estudio de la inactivación del cromosoma X en los abortos espontáneos de familias cuya causa es desconocida. - Otras mutaciones desconocidas además de las ya descritas pueden ser causa de extremado sesgo.