Estudio de los plásmidos SEVA para el desarrollo de nuevas herramientas de biología sintética en cianobacterias.

Abstract

Los vectores plasmídicos son uno de los sistemas más eficientes para la modificación genética en bacterias, pero existe una falta de estandarización de estas herramientas. La librería SEVA-DB es una iniciativa que promueve la utilización de plásmidos sintéticos basados en elementos modulables para facilitar el diseño de los dispositivos genéticos. Sin embargo, no existen publicaciones que estudien de forma sistemática su viabilidad en cianobacterias. En el presente trabajo se establecieron cuáles de estos vectores son más eficientes, mediante diferentes métodos de transferencia del ADN, en el organismo modelo Synechocystis sp. PCC 6803. De entre los siete plásmidos probados, sólo los basados en el origen de replicación RSF1010 presentaron colonias y en estas, la electroporación fue el método más eficiente. Adicionalmente, se diseñó un nuevo vector sintético adaptado al estándar SEVA y este presentó una ventaja conjugativa respecto a los disponibles en la librería. Estos nuevos plásmidos fueron viables tanto en el organismo modelo estudiado, como en la cianobacteria filamentos Anabaena sp. PCC 7120. Este trabajo desarrolla y expande la utilización de los plásmidos SEVA para establecer metodologías optimizadas con el fin de facilitar la biología sintética en cianobacterias.