Estudio del rendimiento de un sistema de vitrificación cerrado basado en altas velocidades de recalentamiento: viabilidad en embrión de ratón

Abstract

La finalidad de este estudio de investigación ha sido estudiar el rendimiento de un portador de vitrificación cerrado, SafeSpeed, diseñado bajo el nuevo paradigma de vitrificación en el cual una alta velocidad de recalentamiento juega un papel esencial, utilizando embriones procedentes del ratón para examinar la viabilidad de obtener una supervivencia alta después de la vitrificación. El dispositivo de vitrificación usado consistió en una pajuela principal donde las muestras se cargaban por aspiración, además se pudo sellar herméticamente antes de sumergirlo en nitrógeno líquido y posteriormente calentarse en un baño de agua tibia a 37 °C. En dicho proyecto se han realizado 12 ensayos repartidos semanalmente donde en cada uno de los ensayos ha existido dos grupos: - Grupo I: grupo control o fresco que se corresponde a las muestras que no fueron criopreservadas y se dejaban en cultivo embrionario para observar su desarrollo morfológico. - Grupo II: grupo experimental que se corresponde a las muestras a las que se le aplicó nuestra técnica de criopreservación. Además, en cada ensayo se realizaron los siguientes controles y análisis: - Análisis del desarrollo morfológico de las muestras biológicas de ambos grupos. - Análisis de la supervivencia morfológica de las muestras biológicas de ambos grupos. - Mortalidad de las muestras biológicas. En términos generales se podría señalar que se encontraron resultados similares en ambos grupos (tasa de supervivencia del 74.8% en el grupo control vs tasa de supervivencia del 74.5% en el grupo experimental), así que concluimos que se obtuvieron resultados muy esperanzadores y en un futuro dicha técnica no solo se convertirá en una herramienta fundamental en la práctica clínica, sino que también podrá emplearse en una amplia gama de sectores, así como para lograr la extinción de determinadas especies, escasez de productos en determinadas estaciones etc.

The purpose of this research study has been to investigate the efficiency of a closed Vitrification holder, SafeSpeed, designed under the new paradigm of vitrification in which a high overheating speed plays an essential role, using embryo from a mouse to examine the viability to obtain a high survival after vitrification. The vitrification device used consisted of a main straw where the samples were loaded by suction. Apart from that, it could be shut hermetically before being inmersed in liquid nitrogen and subsequently being heated in a bath of warm water at 37 degrees. In such a project twelve weekly distributed tests have been carried out and in each of them, two groups have existed: - Group I: control group that corresponds to the samples which were not cryopreserved and were left in embryo culture to observe its morphological development. - Group II: experimental group that corresponds to the samples to which our cryopreservation technique was applied. Furthermore, the next controls and analysis were made in each test: - Analysis of the morphological development of the biological samples in each group. - Analysis of the morphological survival of the biological samples in each group. - Mortality of the biological samples. On the whole, it could be pointed out that similar results were found in each group (a survival rate of 74.8% in the control group vs a survival rate of 74.5% in the experimental group). To conlude very promising results were obtained and in a future such a technique will not only become an essential tool in clinical practice, but it will be able to be employed in a wide range of sectors, as well as to achieve the extinction of certain species, product shortages in certain seasons...