Contribución del regulon Rcs a la virulencia de Salmonella análisis genético y molecular

Abstract

En el momento de iniciar esta tesis, trabajos recientes de nuestro laboratorio en colaboración con el Dr. García del Portillo habían descrito que alelos viables del gen esencial igaA activaban el sistema de transducción de señales Rcs, y que dicha activación atenuaba la virulencia de Salmonella. Se trataba, pues, de un fenómeno nuevo, prácticamente inexplorado y relevante en el campo de la patogénesis bacteriana. De ahí que se fijara como tema de la Tesis el análisis del regulón IgaA-Rcs por métodos genéticos y moleculares. En la práctica, el estudio se dividió en los siguientes objetivos específicos: 1. Aislar mutantes rcs constitutivos de Salmonella enterica y estudiar sus propiedades en el modelo de ratón BALB/c. 2. Diseñar y realizar escrutinios para identificar genes del regulón Rcs de Salmonella enterica, esperando identificar los implicados en la virulencia. 3. Estudiar la regulación del operón srfABC, asignado al regulón Rcs gracias a los escrutinios de esta Tesis, y establecer si SrfA, SrfB y SrfC eran proteínas secretadas. 4. Caracterizar la unidad transcripcional en la que se encuentra el gen igaA e identificar su promotor. 5. Realizar escrutinios genéticos para identificar reguladores del gen igaA. 6. Determinar el mecanismo de regulación de igaA por la proteína transductora de señales MviA, identificada en los escrutinios realizados para el objetivo anterior.