Estudio del Gen de la ferredoxina-glutamato sintasa (glsf) de anabaena sp. Pcc 7120 y de los genes del sistema de las tiorredoxinas de synechocystis sp. Pcc 6803

Abstract

El contenido de esta Tesis Doctoral comprende en una primera parte, el estudio de la enzima ferredoxina-glutamato sintasa de la cianobacteria filamentosa formadora de heterocistos Anabaena sp. PCC 7120. El citado estudio ha incluido tanto la clonacion del gen que codifica dicha enzima, como la caracterizacion de la actividad Fd-GOGAT en esta cianobacteria.

Los resultados derivados de este estudio han demostrado en primer lugar que Anabaena 7120, contiene una sola glutamato sintasa a diferencia de otras especies cianobacterianas que presentan dos enzima con actividad glutamato sintasa. Por otra parte la caracterizacion de la actividad Fd-GOGAT, mostraba que dicha actividad no se regulaba en Anabaena 7120 por la fuente de nitrogeno disponible. Tambien se ha demostrado, mediante medidas de actividad Fd-GOGAT, experimentos de inmunodetección y analisis de la expresión del correspondiente gen glsF, que esta enzima no se encuentra presente en el heterocisto de Anabaena 7120. Lo que sugiere una clara compartimentacion del metabolismo del nitrogeno entre el heterocisto y las celulas vegetativas.

En la segunda parte de esta tesis se ha llevado a cabo un estudio de las tiorredoxinas de la cianobacteria unicelular Synechocystic sp. PCC 6803. Este estudio ha constado del analisis de la regulacion a nivel transcripcional de los gene que codifican estas proteinas en Synechocystis 6803, asi como tambien de los genes ftrC y ftrV que codifican respectivamente las subunidades catalitica y varible de la ferrodoxina tiorredoxina reductasa. La generacion de estirpes mutantes de estos genes ha demostrado que mientras los genes trxA y trxC son esenciales para el crecimiento de Synechocystis, los genes trxB y trxQ son dispensables para dicha cianobacteria. Por ultimo, los mutantes del gen trxC presentan, pese a no segregar completamente la mutacion, un fenotipo pleiotropico que les impide crecer a intensidades de luz moderadas.