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Tesis Doctoral

dc.contributor.advisorMegías Guijo, Manueles
dc.creatorVargas Macías, Carmenes
dc.date.accessioned2018-06-28T09:28:02Z
dc.date.available2018-06-28T09:28:02Z
dc.date.issued1990-10-16
dc.identifier.citationVargas Macías, M.d.C. (1990). Clonación y caracterización de los genes de la nodulación de Rhizobium leguminosarum bv. Phaseoli CIAT899. (Tesis Doctoral Inédita). Universidad de Sevilla, Sevilla.
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/11441/76549
dc.description.abstractComo se puede deducir del resumen sobre la genética de la nodulación expuesto en la Introducción de esta Tesis Doctoral, en este campo los estudios más exhaustivos se han realizado en R. meliloti, B, japonicum y en las biovariedades viciae y trifolii de R. leguminosarum; sin embargo, el conocimiento sobre los genes nod de R. leguminosarum bv. Phaseoli es relativamente escaso. Dentro de R. leguminosarum, la biovariedad phaseoli es la menos relacionada con el resto de los representantes de la especie (Jordan y col., 1984). Las bacterias capaces de nodular P. vulgaris forman un grupo muy heterogéneo, como lo demuestran las diferencias que exhiben las distintas estirpes con respecto criterios tales como patrones de proteínas (Robets y col., 1984) o resistencia a los antibióticos (Beynon y Josey, 1980), mostrando una variabilidad genética tan elevada (Piñero y col., 1988), que ha llevado a proponer la subdivisión de la biovariedad en dos tipos (Martínez y col., 1985; Palacios y col., 1987; Martínez y col., 1990). Esta subdivisión está basada fundamentalmente en el rango de hospedador y en el número de copias de los genes nif: las cepas del tipo I poseen un rango de hospedador limitado a plantas de Phaseolus vulgaris, y tienen repetidos los genes de la nitrogenasa en el plásmido simbiótico; por el contrario, las estirpes del tipo II, entre las que se encuentra CIAT899, contienen solo una copia de los genes nif en su pSym y poseen un rango de hospedador más amplio, siendo capaces de establecer simbiosis efectivas con leguminosas filogenéticamente poco relacionadas con P. vulgaris, como son Macroptilium atropurpureum (siratro) y Leucaena esculenta. Otra característica diferencia a ambos tipos de R. leguminosarum bv. Phaseoli: cuando el plásmido Sym de las estirpes del tipo I se transfiere a Agrobacterium tumefaciens, los transconjugantes son capaces de inducir nódulos en frijol, pero estos no fijan nitrógeno (Brom y col., 1988), sin embargo, la transferencia a A. tumefaciens de los pSym de varios representantes del tipo II (como las estirpes CIAT899 o CFN299) da lugar a transconjugantes capaces de formar nódulos fijadores de nitrógeno en las plantas hospedadoras (Martínez y col., 1987; Brom y col., 1988). Hasta la fecha, el análisis genético de las regiones de nodulación de R. leguminosarum bv. Phaseoli se ha restringido solo a dos representantes de tipo I: las estirpes 8002 y CE3 8Lamb y col., 1985; Cevallos y col., 1989), cuya organización, aún poco caracterizada, se ilustra en la Figura 5. Sin embargo, no hay nada descrito sobre las regiones de nodulación de las estirpes de amplio rango de hospedador, es por ello que ha sido este el objetivo de presente estudio: clonar y caracterizar los genes de la nodulación (genes nod) de R. leguminosarum bv. Phaseoli CIAT899, dirigiendo parte de las investigaciones al estudio de los genes implicados en la determinación del rango de hospedador. La estirpe CIAT899 de R. leguminosarum bv. Phaseoli procede de Colombia (Martínez y col., 1985); antes de iniciar el estudio, y gracias a los trabajos de Martínez y col., (1985) y Brom y col., (1989), se conocía que esta cepa posee dos plásmidos (Fig), de pesos moleculares 120 MDa (plásmido a) y 215 MDa (plásmido b), tanto por hibridación frente a una sonda nifH como por experimentos de transferencia a A. tumefaciens (Brom y col., 1988), que el mayor de los dos (b) es el plásmido simbiótico; sin embargo, también el plásmido (a) debe contener alguna información simbiótica, ya que la transferencia simultánea de ambos plásmidos, a y b, a A. tumefaciens dio lugar a transconjugantes que indujeron nódulos con un mayor porcentaje de fijación que aquellos formados por A. tumefaciens que contenían solo el plásmido Sym (Brom y col., 1988). Además de este conocimiento sobre la estirpe a estudiar, al comenzar el trabajo se contaba con un derivado de la cepa silvestre curado del plásmido simbiótico, la estirpe RSP900, que fue obtenido por M. Megías mediante tratamiento con calor y que da lugar a un fenotipo Nod- en todas las plantas hospedadoras. CONCLUSIONES 1. A diferencia de las estirpes de Rhizobium leguminosarum biovariedad phaseoli tipo I, la cepa CIAT899 de R. leguminosarum bv. Phaseoli (Tipo II) posee una sola región en su plásmido simbiótico, que contiene la información necesaria para la nodulación de sus tres plantas hospedadoras: Phaseolus vulgaris (frijol), Leucaena esculenta (leucaena) y Macroptilium atropurpureum (siratro). 2. La organización de la región de nodulación de CIAT899 es muy similar, en cuanto a la ordenación de los genes nod “comunes”, a la de las regiones nod de R. meliloti y de R. leguminosarum bvs. Trifolii y viciae; no obstante, el gen “específico” nodE se localiza a aproximadamente 19 kb de nodABC, la cual es una distancia inusualmente larga si se compara con las regiones citadas anteriormente. 3. Al igual que ocurre en las estirpes tropicales de amplio rango de hospedador Rhizobium sp. NGR234 y Rhizobium sp. MPIK3030, el gen nodD de R. leguminosarum bv. Phaseoli CIAT899 puede extender el rango de hospedador de otras especies hasta las plantas noduladas por CIAT899, probablemente porque es capaz de reconocer a las moléculas inductoras de los exudados de todas ellas. Por tanto, en la estirpe CIAT899 de R. leguminosarum bv. Phaseoli, el gen nodD es un determinante importante de la especificidad de hospedador.es
dc.formatapplication/pdfes
dc.language.isospaes
dc.rightsAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/*
dc.subjectBiología moleculares
dc.subjectQuímicaes
dc.subjectBioquímicaes
dc.titleClonación y caracterización de los genes de la nodulación de Rhizobium leguminosarum bv. Phaseoli CIAT899es
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesises
dcterms.identifierhttps://ror.org/03yxnpp24
dc.type.versioninfo:eu-repo/semantics/publishedVersiones
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccesses
dc.contributor.affiliationUniversidad de Sevilla. Departamento de Microbiología y Parasitologíaes
idus.format.extent176 p.es
dc.identifier.sisius6016080es

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