Evaluación de la relación genotipo, fenotipo y respuesta a la tetrahidrobiopterina en población andaluza afecta de fenilcetonuria

Abstract

Objetivos: Determinar el fenotipo y genotipo de la población con HFA de Andalucía. Valorar la utilidad de un nuevo test de sensibilidad a BH4 en pacient es con HFA por déficit de PAH. Analizar si existen diferencias nutricionales entre PKU con dieta restringida en PN y PKU con ingesta de PN adecuada a la CDRP por la OMS para su edad, por estar realizando tratamiento con BH4.Material y Método: En una primera fase descriptiva observacional se determinó el fenotipo de los pacientes a partir de los niveles de Phe al diagnóstico de la PKU y mediante la tolerancia de Phe en la dieta. El estudio del genotipo de los PKU se realizó mediante DGGE y secuenciación directa del DNA genómico.El test de sensibilidad a BH4 se realizó, sin necesidad de ingreso hospitalario, sin restricción proteica y realizándose en consulta una sobrecarga oral con 100 mg/Kg de Phe y a las 3 horas administración de una dosis única de BH4 de 20 mg/Kg, vía oral con controles de los niveles de Phe a las 0, 7, 12 y 24 horas tras la ingesta de BH4. Las últimas 3 determinaciones se extraen en sangre seca en papel en el domicilio del paciente y se remiten por correo.Para la determinación del estado nutricional se determinaron los niveles de prealbúmina, albúmina, transferrina y P.R.L en pacientes con PKU antes de iniciar el tratamiento con BH4, realizando una dieta restringida en Phe, y al año de iniciarse la terapia con este fármaco con dieta sin restricción en PN.Resultados: Se determinaron el fenotipo y el genotipo de 165 y 147 pacientes con déficit de PAH respectivamente. El fenotipo más frecuente en la población andaluza fue la PKUC (40% de las HFA). Además, se observó que un grupo de pacientes no quedarían reflejados en la clasificación de Güttler por lo que se agruparon en una versión modificada de ésta, creando un grupo para los pacientes que toleran menos de 250 mg de Phe al día (35,2% de HFA) y otro para aquellos con una tolerancia superior a 800 mg de Phe al día (14,1% de HFA). Destacar que los niveles de Phe al diagnóstico se han mostrado como un buen indicador del fenotipo de nuestros pacientes. Se observaron 71 mutaciones siendo las más frecuentes IVS10nt11-g>a (10,9%), S349P (8,2%) y V388M (7,5%). Se han detectado 7 mutaciones nuevas. Todos estos datos le confieren una gran heterogeneidad a la población con HFA andaluza. Se ha apreciado como esta diversidad genética es similar a la apreciada con anterioridad en el resto de España en comparación con otras poblaciones próximas.Después de realizar 118 test de sensibilidad a BH4, y de excluir 3 por presentar vómitos durante la prueba, se ha valorado este nuevo test que mostró ser una herramienta cómoda y eficaz para detectar los pacientes con HFA por déficit de PHA susceptibles de realizar dicho tratamiento. Una disminución de más del 50% de los niveles de Phe a las 24 horas de la toma de la BH4 sería un resultado positivo (41,7% de casos), un descenso del 40-50% sería dudoso con necesidad de realizar una prueba terapéutica (4,3% de casos) y negativo si fuera menor del 40% (52,9% de casos).El fenotipo y el genotipo se pueden mostrar como buenos indicadores a la hora de valorar una posible sensibilidad al tratamiento con BH4 en los pacientes con HFA.El perfil nutricional de los pacientes con HFA, valorando la prealbúmina, albúmina, transferrina y P.L.R, no muestra diferencias estadísticamente significativas entre realizar dieta restringida en Phe con un suplemento adecuado de aminoácidos exentos de Phe y tener una ingesta de PN adecuada a la CDRP para la edad del paciente por estar realizando tratamiento con BH4, al año de aumentar la ingesta de PN.Conclusiones: En los casos de HFA de nuestro estudio la PKUC es el fenotipo más frecuente. Se ha mostrado una gran diversidad genética en los pacientes con HFA. El nuevo test de sensibilidad es un método eficaz de determinar qué pacientes con HFA pueden beneficiarse de tratamiento con BH4. No se observan diferencias nutricionales entre pacientes con restricción proteica y aquellos que han realizado tratamiento con BH4 con “liberalización” dietética.