Estudio de expresión diferencial de genes y distribución de la vinculina en ovario de cerdas

Abstract

El objetivo de este estudio es analizar las diferencias en la expresión de genes y proteínas en tres estadios reproductivos en cerdas. Con el fin de caracterizar los cambios en los perfiles de expresión, se hibridó RNA de ovario de cerdas en celo, 15 y 45 días de gestación en microchips porcinos. Se detectaron diferencias de expresión en 281 genes (probabilidad posterior <10-11) entre los tres momentos reproductivos analizados en ovario. Uno de estos genes, la vinculina, mostró una expresión 100 veces mayor en celo comparado con 45 días de gestación. Por ello, fue escogido para realizar un análisis de expresión proteica mediante inmunohistoquímica y análisis western blot. Los resultados obtenidos mediante inmunohistoquímica muestran mayor cantidad de vinculina en celo que a 30 días de gestación. Para esta misma proteína, los resultados sugieren la existencia de diferencias significativas entre ovarios de cerdas en celo y a 45 días de gestación mediante la técnica western blot

Study on the differential gene expression and distribution of the vinculin in the ovary of sows The objective of this experiment is to study genes and proteins differing across reproductive stages in swine. RNA from ovary, from sows on heat, 15 and 45 days of pregnancy have been hybridised in porcine oligonucleotide microchips to characterize changes in gene expression profile between different reproductive stages. Expression differences in 281 genes (posterior probability <10-11) have been found between expression at different stages in ovary. One of these genes, vinculin, showed 100 times more expression on heat than at 45 days of pregnancy, so we chose that gene for immunohistochemistry and western blot analysis. On immunohistochemistry we found that ovaries of sows on heat showed stronger vinculin staining than ovaries stroma of sows at 30 days of pregnancy. On western blot, significant differences appeared only between heat and 45 days of pregnancy.