Aproximación genético-bioquímica al estudio de la asimilación de nitrato en la cianobacteria "Anacystis nidulans R2"

Abstract

Tras mutagénesis con transposón se han aislado 19 estirpes de la Cianobacteria Anacystis nidulans R2 incapaces de crecer en medio con nitrato como única fuente de nitrógeno. Se distinguen tres diferentes fenotipos en relación a la a ... ctividad de las enzimas implicadas en la reducción del nitrato. La estirpe FM16 muestra tanto actividad nitrato reductasa como actividad nitrito reductasa FM2 carece de la actividad nitrito reductasa y las restantes 16 estirpes carecen de la actividad nitrato reductasa. Con la excepción de FM2 que requiere amonio para crecer todas las demás estirpes mutantes crecen en medios con nitrito o amonio como únicas fuentes de nitrógeno. Los resultados de ensayos de transformación con plásmidos que contienen genes implicados en la asimilación de nitrato han permitido la clasificación de las 16 estirpes carentes de nitrato reductasa en tres grupos diferentes que corresponden a tipos previamente descritos. Estudios de los niveles de actividad nitrato reductasa en medios conteniendo diferentes fuentes de nitrógeno mostraron que a diferencia de lo que ocurre en la estirpe silvestre en las estirpes FM2 y FM16 la síntesis de nitrato reductasa es constitutiva encontrándose niveles significativos de enzima en células cultivadas en amonio. Por tanto FM2 representa un nuevo tipo de estirpe mutante afectada en asimilación de nitrato careciendo de nitrito reductasa y mostrando una regulación alterada del sistema de asimilación de nitrato. Por otra parte FM16 es otro mutante original que parece hallarse afectado a nivel de la entrada del nitrato en la célula así como desrregulado respecto a la represión por amonio de la síntesis de nitrato reductasa. Algunas de las estirpes mutantes se han utilizado en estudios encaminados a la caracterización del consumo de nitrato en Anacystis nidulans. Se ha obtenido información relevante concer|