Ramos Morales, FranciscoBernal Bayard, Joaquín2025-06-202025-06-202025-03-28Bullones Bolaños, A.S. (2025). Análisis funcional de una familia de efectores de Salmonella enterica con actividad ligasa de ubicuitina. (Tesis Doctoral Inédita). Universidad de Sevilla, Sevilla.https://hdl.handle.net/11441/174539En el presente trabajo, realizamos un análisis funcional de los efectores SlrP, SspH1 y SspH2 de S. Typhimurium, los cuales pertenecen a la familia de ligasas de ubicuitina conocida como NEL. Estudiamos la expresión de los tres efectores durante la infección de distintos tipos celulares utilizando fusiones transcripcionales de sus promotores con el operón lux y observamos que PhoP regula la expresión de slrP y sspH1, pero no de sspH2 en las condiciones de infección utilizadas. Determinamos que SspH1 y SspH2 forman polímeros de ubicuitina preferencialmente con la K48, mientras que SlrP no requiere de la presencia de la K48 o la K63 para formar polímeros. Validamos a SNRPD2 como un sustrato específico de SlrP e identificamos los residuos claves para la modificación de esta proteína por el efector. Estudiamos la especificidad o redundancia entre los efectores de la misma familia evaluando la capacidad de proteínas quimeras para ubicuitilar sustratos específicos. Mediante espectrometría de masas identificamos nuevos sustratos potenciales de los efectores y validamos la ubicuitilación de AURKAIP1, DCD, NCLN, PRC1 y SKP1 in vitro. Determinamos que estos efectores disminuyen la secreción de las citoquinas IL-6 y CCL5. Estudiamos la influencia de los efectores sobre el crecimiento de la levadura y observamos que la expresión de SspH1 catalíticamente activo altera tanto su crecimiento como su perfil de polisomas. En conjunto nuestros resultados contribuyen con la caracterización funcional de los efectores de la familia NEL y el estudio de los mecanismos moleculares que determinan el rol que tienen estos efectores durante la infección.application/pdf201 p.spaAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internationalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccess