Navas Castillo, JesúsFiallo Olivé, Elvira2024-11-252024-11-252024-09-30García Merenciano, A.C. (2024). Tomato chlorosis Virus: harnessing infectious Clones for reverse genetics and expression vector Development. (Tesis Doctoral Inédita). Universidad de Sevilla, Sevilla.https://hdl.handle.net/11441/164826Tomato chlorosis virus (ToCV) is a rapidly spreading crinivirus, whose global distribution has increased significantly over the past two decades. This work focuses on studying the minor capsid protein (CPm) of ToCV and its role in transmission, employing Bemisia tabaci MED and Trialeurodes vaporariorum as insect vectors. We investigated the molecular basis underlying its distinct transmission patterns. Notably, ToCV stands out as one of two criniviruses known to be transmitted by whitefly species from both genera, Bemisia and Trialeurodes. Moreover, developed expression vectors for GFP and Ros1 proteins derived from the infectious clone of ToCV AT80/99, utilizing Nicotiana benthamiana plants via agroinoculation. Additionally, efforts were made to establish a controlled infection system for pepper plants by synthesizing the infectious clone of ToCV from the MM8 isolate, which naturally infects pepper plants. Given the lack of commercially available tomato varieties resistant or tolerant to ToCV, virus control heavily relies on measures against vectors. Therefore, it becomes imperative to develop molecular tools that enhance our understanding of viral proteins and their interactions with both hosts and vectors.El virus del amarilleo del tomate (tomato chlororsis virus, ToCV) es un crinivirus de rápida expansión, cuya distribución global ha aumentado significativamente en las últimas dos décadas. Este trabajo se centra en el estudio de la proteína de la cápsida menor (CPm) de ToCV y su papel en la transmisión, empleando Bemisia tabaci MED y Trialeurodes vaporariorum como insectos vectores. En este trabajo hemos investigado las bases que subyacen a sus distintos patrones de transmisión. Es importante destacar que ToCV es uno de los dos crinivirus transmitidos por especies de mosca blanca de ambos géneros, Bemisia y Trialeurodes. Además, desarrollamos vectores de expresión para las proteínas GFP y Ros1 derivadas del clon infectivo de ToCV AT80/99, utilizando plantas de Nicotiana benthamiana, mediante agroinoculación. Asimismo, se realizaron esfuerzos para establecer un sistema de infección controlada para plantas de pimiento mediante la síntesis de un clon infectivo de ToCV a partir del aislado MM8, que infecta naturalmente a pimiento. Dado que no existen variedades comerciales de tomate resistentes o tolerantes a ToCV, el control del virus depende en gran medida de medidas contra los vectores biológicos. Por lo tanto, resulta imperativo desarrollar herramientas moleculares que mejoren nuestra comprensión de las proteínas virales y sus interacciones tanto con los huéspedes como con los vectores.application/pdf142 p.engAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internationalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/embargoedAccess