Detección y genotipado del virus del papiloma humano mediante una técnica de PCR a tiempo real: utilidad de la muestra de orina

Abstract

La infección por el virus del papiloma humano (VPH) es una causa necesaria, aunque, por si sola, insuficiente para el desarrollo del cáncer de cérvix. Normalmente las infecciones por VPH se resuelven espontáneamente, pero un pequeño porcentaje de ellas, dan lugar al desarrollo de lesiones pre-neoplásicas que pueden derivar en lesiones invasivas de la mucosa produciendo el cáncer. El tiempo medio entre la infección por el VPH y el desarrollo de las lesiones pre-neoplásicas suele ser de unos 10 años y entre el desarrollo de estas últimas y el cáncer está entorno a otros 10 años. Actualmente están descritos más de 100 tipos de VPH, aunque solo un pequeño grupo de ellos, denominados de alto riesgo, son responsables del cáncer de cérvix. De este grupo de alto riesgo, los genotipos VPH-16 y VPH-18 son responsables de más del 70% de los casos de cáncer de cérvix. Una característica casi única del cáncer de cérvix provocado por los genotipos VPH-16 y VPH-18, es que actualmente puede ser prevenido mediante campañas sistemáticas de vacunación. La infección por VPH es una infección de transmisión sexual y por tanto, la primera forma de prevenir el cáncer de cérvix consiste en promover campañas de educación sobre las practicas de riesgo y de vacunación en jóvenes, antes del inicio de las relaciones sexuales. En segundo lugar, la prevención secundaria en mujeres no vacunadas, consiste en la realización de cribados mediante realización periódica de citologías y/o de pruebas moleculares de detección de ADN del VPH, en muestras cervicales y tratamiento asociado en los casos positivos. Actualmente está demostrado que la detección del VPH es más sensible y presenta un valor predictivo negativo mayor que la realización de citologías para la detección de lesiones pre-neoplásicas, por tanto, los diferentes programas internacionales de cribado de cada país cada vez tienden a emplear las pruebas de VPH como prueba inicial del cribado de cáncer de cérvix. No obstante, los citados programas, que se basan en la toma de muestra cervical, requieren una infraestructura sanitaria y una cualificación del personal sanitario que no siempre está disponible, sobre todo, en países en vías de desarrollo, en donde se concentra la mayor incidencia de este tipo de cáncer. Por otro lado, existen barreras étnicas, culturales, religiosas, etc.... que impiden que muchas mujeres se sometan a la exploración pélvica necesaria para la toma de muestra de cérvix. Por lo tanto, los citados programas de cribado de cáncer de cérvix no llegan a toda la población susceptible de someterse a ellos. En esta tesis se desarrolla un método basado en la tecnología de PCR a tiempo real que permite simultáneamente la detección de la infección por el VPH y la de los genotipos VPH- 16 y VPH-18 que son los tipos más oncogénicos como se ha comentado anteriormente. La segunda parte de la tesis se basa en la utilización de la misma tecnología para la detección y genotipado del VPH en una muestra no invasiva como es la orina de las pacientes. De este modo, no tendrían que someterse a la exploración pélvica favoreciendo el aumento de la cobertura sanitaria y también disminuyendo los costes asociados al cribado basado en la toma de muestras cervicales La conclusión principal consiste en que la muestra de orina puede ser empleada para la detección de infecciones por el VPH de alto riesgo y para la detección de lesiones preneoplásicas de alto grado